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鉴于间充质干细胞（MSCs）具有自我增殖和分化为多种细胞类型的能力，已然成为再生医学中颇具吸引力的候选细胞。目前为止，仅开展有限数量的关于间充质干细胞来源外泌体的人体临床试验，仍有许多问题亟待解决，如异质性细胞外囊泡群体是否有益；某些特定亚群是否代表了间充质干细胞在目标组织或细胞上的特定功能，如何标准化sEVs的分离和纯化流程的基础上保证高产量、低成本的确定的成分以实现其临床应用。

南京医科大学李晶教授团队发表了名为《Distinct molecular properties and functions of small EVsubpopulations isolated from human umbilical cordMSCs using tangential flow filtration combined with size exclusion chromatography》的文章，该文章的目的是建立适用于大规模生产间充质干细胞sEVs方案，提供了一种利用切向流过滤（TFF）结合尺寸排阻色谱法（SEC）从人脐带间充质干细胞（HucMSCs）中大规模制备sEVs的方法。所得到的亚群S1-sEVs和S2-sEVs在粒径、膜标记蛋白和携带标志物方面表现出稳定的差异。进一步的研究表明，两种不同的sEVs亚群分别对应不同的生物学过程：ESCRT途径和由脂筏代表的ESCRT独立途径，验证了用间充质干细胞中大规模分离和纯化具有不同功能的sEVs亚群的可能性，为各种间充质干细胞适应症的靶向治疗干预提供了可能性。

文中将TFF与SEC系统结合，从人脐带间充质干细胞培养基中分离出sEVs。对不同亚群的粒径、浓度进行表征，对两种亚群蛋白组学、RNA组成情况、S1-sEVs和S2-sEVS对细胞增殖和巨噬细胞极化的不同调控作用等一些列表征，证明该方法对于间充质干细胞中大规模分离和纯化具有不同功能的sEVs亚群是可以实现的。

图1. 通过TFF与SEC结合系统分离并表征人脐带间充质干细胞中的sEVs亚群

图1中采用德国ZetaView纳米颗粒跟踪分析仪对分离出的不同组分进行粒径和浓度表征，并与TEM检测结果结合，揭示了S1-sEVs粒径范围70-200nm，峰值粒径113.3；S2-sEVS粒径范围50-160nm，峰值粒径为88.3nm，实现对多组分精准区分。

通过一系列实验包括S1-sEVs和S2-sEVS亚群在后肢缺血、皮肤伤口愈合和在生物生成过程的差异调节，进一步证明不同亚群的间充质干细胞sEVs针对特定疾病的治疗效果是有差异的，见图2和图3。

图3. S1-sEVs和S2-sEVs在后肢缺血中的不同治疗效果

虽然源自间充质干细胞的sEVs在临床应用上备受推崇，但本文的研究引入新的概念，即利用不同间充质干细胞的sEVs亚群针对定疾病进行靶向治疗，细化了不同亚群sEVs对于疾病的治疗效果，为间充质干细胞和sEVs亚群的应用指明了新的方向。